本发明公开了一种用离子液体提取分离蛋白质和/或酶的方法。该方法包括下列步骤：原料预处理，加入含离子液体的萃取剂，萃取液离心、过滤、纯化、浓缩即可。该方法采用离子液体为萃取剂主要成分，提取分离高效、快捷，萃取剂安全，可以多次反复使用，提取分离的蛋白质与酶能够保持活性，并且提取与分离步骤合二为一，操作简捷方便。