本发明提供耐久肠球菌及其产生的可抑制李斯特菌的细菌素，涉及微生物领域。耐久肠球菌（Enterococcus durans)NJ株，其保藏登记号为:CGMCC No.7236。NJ株产生的可抑制李斯特菌的细菌素。所述细菌素的制备方法，发酵培养NJ株，获得发酵液，纯化后得到所述细菌素。NJ株产生的可抑制李斯特菌的细菌素具有较好的 pH、热稳定性，只对李斯特菌具有瞬时高效的抑制作用，因此将该细菌素可以应用于食品保鲜。本发明采用NJ株发酵后纯化制得细菌素，方法简单，效率高，成本低，安全。